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真菌染色液(六胺銀法)

發(fā)布時(shí)間:2020-1-16      閱讀次數(shù):7051
產(chǎn)品編碼 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 單位 有效期
BA4244B 真菌染色液(六胺銀法) 20測(cè)試 1年


       【原理

         標(biāo)本經(jīng)高碘酸氧化后,使真菌和其他機(jī)會(huì)性生物的細(xì)胞壁內(nèi)的粘多糖暴露出醛基,醛基將六胺銀還原為黑色的金屬銀。硫代硫酸鈉對(duì)已顯色的銀鹽起固定作用,并除去未反應(yīng)的銀離子。
 
【樣本要求】
挑取樣本制成涂片,涂片時(shí)必須注意細(xì)心操作,涂片薄而均勻。制備的涂片應(yīng)自然干燥,若采取加熱固定,固定溫度不宜過(guò)高,以玻片背面接觸手背不燙為準(zhǔn),否則可能使標(biāo)本的形態(tài)改變影響觀察結(jié)果。
 
【檢驗(yàn)方法】
一、工作液配制:(一份工作液約8.2ml,可染8 張片):
使用器材(自備):一次性試管、移液器,一次性吸嘴、滴管。
200μl 硝酸銀溶液+3ml 六次甲基四胺溶液+1 瓶硼砂溶液,混合成一份工作液。
具體操作:于潔凈的試管內(nèi)加入200μl 硝酸銀溶液和3ml 六次甲基四胺溶液,充分混勻,然后倒進(jìn)1 瓶硼砂溶液的瓶?jī)?nèi),充分搖勻,如肉眼見少許透明顆粒,屬正常現(xiàn)象,請(qǐng)勿過(guò)濾,備用。
(請(qǐng)按照以上順序進(jìn)行配制,以免影響工作液的效果。若工作液在當(dāng)天用完,則放常溫儲(chǔ)存即可;若在當(dāng)天未能用完,則須密封避光放2℃~8℃冰箱儲(chǔ)存,并在一個(gè)月內(nèi)使用完)。
 
【染色步驟】
1、挑取樣本制成涂片,自然干燥后加熱固定;
2、滴加高碘酸溶液氧化15min,蒸餾水稍洗;
3、將涂片放入染色玻片盒內(nèi),并將玻片盒置于62℃水浴箱中,使玻片盒漂浮于水面上。滴加1ml 工作液于涂片上,再
蓋上盒蓋和水浴箱蓋,染色5~10min,見標(biāo)本有黃棕色反應(yīng)時(shí),取出。(注意:工作液不能接觸到金屬離子,請(qǐng)確保水浴
箱的溫度到達(dá)62℃);
4、用蒸餾水洗后鏡檢,如著色不夠深,再重復(fù)步驟3 繼續(xù)作用;
5、流水沖洗;
6、用硫代硫酸鈉溶液處理3min,流水沖洗;
7、用亮綠染液復(fù)染30~60s,水洗,待干,油鏡觀察。
 
【染色結(jié)果】
真菌的菌絲及孢子呈棕黑色或黑色,結(jié)構(gòu)清晰明顯,背景為綠色。
 

*禁忌內(nèi)容或注意事項(xiàng)詳見說(shuō)明書


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